本书以具有极强再生能力的仿刺参为研究对象,系统阐述了其肠道再生的关键基因及分子调控机制。全书概述了仿刺参的生物学特性及再生特性,通过构建再生早期转录组,筛选出与肠再生过程密切相关的关键基因。核心内容聚焦于 megf 6、klf13 和btf 3l4 三个关键基因,详细介绍了其克隆、序列特征、表达模式、蛋白定位及其在再生过程中的调控作用。最后,整合相关通路基因的表达分析,初步揭示了蛋白MEGF6、KLF13 和 BTF3L4 在仿刺参肠再生中的协同调控机制。
本书可为从事仿刺参基础生物学研究、水产增养殖学等学科研究的科研人员与院校师生提供理论参考。
第一章 海参概述 1
第一节 海参生物学 2
一、海参的主要特征 2
二、仿刺参的主要特征 2
三、仿刺参的特殊习性 3
第二节 仿刺参的再生特性 5
一、排脏 5
二、再生 6
三、再生机制 9
四、研究再生相关基因的意义 12
参考文献 13
第二章 仿刺参再生早期转录组学 19
第一节 仿刺参再生早期转录组的构建 20
一、转录组学与仿刺参再生 20
二、仿刺参DNA 文库的获得 20
三、高通量测序 22
四、数据过滤后的reads 情况 23
五、参考基因组、基因比对 26
第二节 仿刺参再生早期转录组分析 27
一、过滤后序列整体分析 27
二、基因所属转录因子家族分类 30
三、样本相关性分析 30
四、基因表达量分析 30
五、GO 注释 32
六、KEGG Pathway 分类与富集 35
第三节 差异表达基因筛选 42
参考文献 44
第三章 仿刺参megf 6 基因克隆及在肠再生中的表达分析 47
第一节 MEGF6 蛋白的功能 48
第二节 仿刺参megf 6 基因克隆及表达分析 49
一、样品制备 49
二、总RNA 提取 49
三、Aj-megf6 基因全长序列的获得 50
四、Aj-megf6 的生物信息学分析 51
五、Aj-megf6 基因在肠再生过程中的表达模式 57
第三节 仿刺参MEGF6 蛋白的特征及调控作用 58
一、Aj-MEGF6 的同源性及进化关系 58
二、Aj-MEGF6 重组蛋白的获得、表达与纯化 63
三、Aj-MEGF6 的免疫荧光定位 64
四、Aj-MEGF6、CDH1 与SNAI2 的调控关系 64
参考文献 66
第四章 仿刺参klf 13 基因克隆及在肠再生中的表达分析 69
第一节 KLF13 蛋白的功能 70
第二节 仿刺参klf 13 基因克隆及表达分析 71
一、Aj-klf13 基因全长序列的获得 71
二、Aj-klf13 的生物信息学分析 72
三、Aj-klf13 基因在肠再生进程中的表达模式 76
第三节 仿刺参KLF13 蛋白的特征及调控作用 77
一、Aj-KLF13 的同源性及进化关系 77
二、Aj-KLF13 重组蛋白的获得、表达与纯化 78
三、Aj-KLF13 的免疫荧光定位 80
四、Aj-KLF13 与CREB1、CDK2 的调控关系 81
参考文献 82
第五章 仿刺参btf 3l 4 基因克隆及在肠再生中的表达分析 86
第一节 BTF3 蛋白的功能 87
第二节 仿刺参btf 3l 4 基因克隆及表达分析 88
一、Aj-btf3l4 基因全长序列的获得 88
二、Aj-btf3l4 的生物信息学分析 89
三、Aj-btf3l4 基因在肠再生过程中的表达模式 92
第三节 仿刺参BTF3L4 蛋白的特征及调控作用 93
一、Aj-BTF3L4 的同源性及进化关系 93
二、Aj-BTF3L4 重组蛋白的获得、表达与纯化 95
三、Aj-BTF3L4 的免疫荧光定位 96
四、Aj-BTF3L4 与BMI1 的调控关系 97
参考文献 98
第六章 蛋白MEGF6、KLF13 和BTF3L4 在仿刺参肠再生过程中的调控机制 102
第一节 相关通路基因蛋白的表达模式 103
一、仿刺参再生相关通路 103
二、Aj-egfr、wnt6 基因在肠再生过程中的表达模式 103
三、Aj-EGFR、WNT6 蛋白在肠再生过程中的表达模式 104
第二节 仿刺参肠再生调控机制 106
一、仿刺参肠再生机制 106
二、MEGF6、KLF13 和 BTF3L4 在肠再生过程中的
调控机制 106
参考文献 108
缩略词表 111
附录 112