本书在介绍蛋白质研究基本内容的同时,又能反应该领域快速发展的新技术和成果。本书在内容和结构上采用基础理论和实验操作两部分相结合,并以基础理论为主的编排处理,并在每一章内容中都包含了当前的一些最新进展。基础理论部分包括十五章,第二至第六章详细介绍了蛋白质研究的一般原则和以色谱技术为主的常用的分离纯化技术的理论基础;第七至十章内容包含了对蛋白质理化性质和一级结构、空间结构的鉴定;第十一至十三章分别涉及蛋白质相互作用的研究技术、蛋白质和多肽的化学合成技术、蛋白质的化学修饰技术,以便获得某种特殊功能的蛋白质的方法;第十四、十五章介绍了当前发展非常迅速的蛋白质组学及一生物信息学的内容,便于读者了解最新的蛋白质研究方法。实验操作部分选取了常用的和基本的11个蛋白质技术实验,实验步骤详尽,而且每个实验都经过了反复实验操作的验证,参考价值和可重复性都非常强。最后的附录部分收录了蛋白质研究中经常用到的一些参考数据,可方便查询和使用。
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陕西省高校青年建设创新团队,2019年,排名第2
目录
第一章 绪论 1
第一节 研究蛋白质的重要性 1
第二节 蛋白质研究技术的发展 2
第三节 蛋白质研究技术的主要内容 8
参考文献 9
第二章 蛋白质化学及蛋白质分离纯化的基础 10
第一节 蛋白质的分子组成 10
第二节 蛋白质的分子结构 14
第三节 蛋白质结构与功能的关系 21
第四节 蛋白质的理化性质 23
第五节 蛋白质的种类和功能 27
第六节 蛋白质纯化方案设计的基本原则 31
参考文献 34
第三章 蛋白质提取和粗分离 35
第一节 原材料的选择和处理 35
第二节 细胞的破碎与分离 36
第三节 蛋白质的沉淀 40
参考文献 52
第四章 蛋白质层析分离 53
第一节 层析法概述 53
第二节 离子交换层析 55
第三节 凝胶过滤层析 64
第四节 疏水和反相层析 69
第五节 亲和层析 73
参考文献 76
第五章 蛋白质电泳分离 77
第一节 电泳技术概述 78
第二节 电泳技术的类型 80
第三节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 84
第四节 非连续缓冲系统聚丙烯酰胺凝胶电泳 86
第五节 等电聚焦电泳和双向电泳 89
第六节 蛋白质的转移电泳 94
第七节 毛细管电泳 95
参考文献 97
第六章 蛋白质纯化中的衔接技术 98
第一节 蛋白质的浓缩 98
第二节 蛋白质的脱盐 104
第三节 蛋白质生物活性的保持 106
第四节 蛋白质纯化过程中的监测 110
参考文献 113
第七章 高效液相色谱和超高效液相色谱 114
第一节 基本概念 115
第二节 高效液相色谱法 117
第三节 超高效液相色谱 123
参考文献 128
第八章 蛋白质的鉴定技术 129
第一节 蛋白质含量测定 129
第二节 蛋白质纯度测定 136
第三节 蛋白质分子量测定 140
第四节 蛋白质等电点测定 149
参考文献 151
第九章 蛋白质分子一级结构测定 153
第一节 蛋白质的氨基酸组成测定 153
第二节 蛋白质的末端测定 155
第三节 亚基拆离、肽链降解和肽段的分离 159
第四节 肽段的氨基酸顺序测定 162
第五节 氨基酸自动测序仪的工作原理 165
第六节 质谱技术在肽和蛋白质的序列测定中的应用 166
参考文献 168
第十章 蛋白质的空间结构分析 169
第一节 X射线晶体学技术 170
第二节 核磁共振波谱学技术 175
第三节 电子晶体学及电子显微镜三维结构 177
第四节 蛋白质空间结构预测及建模 180
参考文献 185
第十一章 蛋白质相互作用的研究技术 186
第一节 在异种系统中检测蛋白质-蛋白质相互作用 186
第二节 在活细胞中检测蛋白质-蛋白质相互作用 189
第三节 应用离体实验方法检测蛋白质-蛋白质相互作用 191
参考文献 194
第十二章 蛋白质和多肽的化学合成技术 196
第一节 多肽化学合成的基本原理 197
第二节 液相肽合成法 200
第三节 固相肽合成法 202
第四节 多肽合成仪 208
第五节 多肽合成后的裂解 222
第六节 合成多肽的分离纯化及鉴定 225
第七节 多肽合成、裂解、分离纯化的应用实例 226
参考文献 234
第十三章 蛋白质的化学修饰技术 235
第一节 化学修饰的原理与方法 235
第二节 化学修饰在医药领域的应用 240
第三节 蛋白质化学修饰的展望 245
参考文献 246
第十四章 蛋白质组学及其研究技术 247
第一节 蛋白质组学的产生及其研究目的和任务 248
第二节 蛋白质组学研究技术与路线 251
第三节 蛋白质组研究进展与应用 268
参考文献 274
第十五章 生物信息学 276
第一节 生物信息学概述 276
第二节 常用的生物信息学数据库 277
第三节 生物信息学数据的分析与挖掘 281
第四节 生物信息学在蛋白质研究中的应用 283
参考文献 286